進(jìn)口PCR板是一種用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。它可以被視為一種特殊的DNA體外復(fù)制。PCR技術(shù)的基本原理類(lèi)似于DNA的自然復(fù)制過(guò)程,其特異性取決于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。
進(jìn)口PCR板的反應(yīng)特點(diǎn):
1、高度特異性PCR反應(yīng)的特定決定因素如下:
①引物特異且正確地結(jié)合模板DNA;
②堿基配對(duì)原理;
③TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的保真度;
④靶基因的特異性和保守性。
2、高靈敏度
PCR產(chǎn)物的量呈指數(shù)級(jí)增加,這可以將待測(cè)試的初始模板從皮克(pg=10-12)放大到微克(μG=-6)水平。可以從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢測(cè)到一個(gè)目標(biāo)細(xì)胞;在病毒檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU;在細(xì)菌學(xué)中,zui的小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
3、簡(jiǎn)單快捷
耐高溫TaqDNA聚合酶用于PCR反應(yīng)。一次性加入反應(yīng)溶液后,在DNA擴(kuò)增溶液和水浴上進(jìn)行變性退火延伸反應(yīng),擴(kuò)增反應(yīng)通常在2-4小時(shí)內(nèi)完成。擴(kuò)增產(chǎn)物通常通過(guò)電泳分析,不一定通過(guò)同位素分析,并且沒(méi)有放射性污染,易于推廣。
4、樣品純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌并培養(yǎng)細(xì)胞。粗DNA產(chǎn)物和RNA可以用作擴(kuò)增模板。可通過(guò)血液、體腔液、洗滌液、頭發(fā)、細(xì)胞、活組織等臨床樣本的DNA擴(kuò)增直接檢測(cè)。