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實驗新手必知:人ELISA試劑盒實驗操作
隨著人們對ELISA試劑盒回答的逐步認識,以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,更為快速簡便的免疫檢驗方法就應(yīng)運而生了。
實驗新手要怎樣選擇人ELISA試劑盒啊?規(guī)格、品牌要哪種?哪家公司的好……許多剛剛接觸ELISA實驗的客戶會問出這樣那樣的一些小問題,選擇產(chǎn)品大家可以從優(yōu)勢、服務(wù)這兩方面來重點考慮,而對于哪種試劑盒好首先向您推薦品牌的,這種也是用的zui多的。在國內(nèi)代理試劑盒的供應(yīng)商不在少數(shù),只要是,質(zhì)量都是可以保證的,朋友們也要千萬注意不要買到了假貨。可以根據(jù)公司信譽、服務(wù)等方面參考,還有盒子的包裝,是選擇質(zhì)量保證的公司(如:國內(nèi)試劑盒供應(yīng)商上海古朵、天津本生、上海源葉等)。
試驗中各個操作步驟常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助:這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測的病原體感染診斷治療的要求,迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑,直接的或是間接的。
ELISA試劑盒的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特定的比色計上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化有重要意義。
選擇ELISA試劑盒涉及到了使用的問題,在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
ELISA試劑盒的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測標本。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。的試劑,良好的儀器和準確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標本可直接進行測定,有些則需經(jīng)預(yù)處理。
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